水稻葉綠素含量的簡易測定
來源： 本站 類別：實用技術 更新時間：2010-06-10 閱讀次
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水稻葉綠素含量的簡易測定
水稻葉綠素含量直接影響光合作用強度,并與氮素營養有密切關系。了解與控制葉綠素含量,對提高植物的產量有一定意義。自從Mackinney (1941) 建立的提取和測定葉綠素含量的方法以來, 直至Hiscox (1979)等用二甲亞礬(DMSO) 直接浸泡測定高等植物葉綠素含量〔1〕,還有陳福明〔2〕、張憲政〔3〕等人提出了丙酮乙醇水混合液法, 但上述測定方法還存在煩瑣的弊病。為此,我們進行了一些改進,測試方法簡便易行。當然測定葉綠素含量還有更為簡單的方法，即直接使用儀器來測定。市面上測定葉綠素的儀器通常有手持葉綠素儀、葉綠素測定儀、SPAD502葉綠素儀。
1 測定方法和步驟
在水稻各生育時期自上而下取三片葉,用剪刀剪碎(長1 cm 以下) ,各處理分別稱2 g 鮮重,放入帶塞的三角瓶中,并分別用95 %乙醇和80 %丙酮作為浸提液,將浸提液小心傾入100 ml 容量瓶中,定容至100 ml 。搖勻后, 吸5 ml 該液于50 ml 容量瓶中, 用95 %乙醇和80 %丙酮分別定容至50 ml ,然后用分光光度計比色測定。
2 結果
2. 1 不同有機溶劑浸提葉綠素含量的比較 由表1 看出,用95 %乙醇作為浸提液,測得的葉綠素含量在所有處理中均比用80 %丙酮作浸提液的高。其差值平均為0. 274 ±0. 204 ,平均高13. 10 %。說明用95 %乙醇浸提效果比80 %丙酮的好。
2. 2 葉綠素浸提母液降解速率的對比 據前人報道,葉綠素浸提液在光照條件下會迅速降解,其速率比在黑暗條件下要高10 倍之多〔4 ,5〕。為此, 我們對暗保存下的葉綠素浸提液降解速率進行了分析統計,結果表明:保存一天的降解速率為0. 46 ±2. 218 %, 差異不顯著;保存一星期的降解速率為14. 0 ±2. 446 %(見表2 、3) 。
3 小結
3. 1 試驗結果表明, 水稻葉綠素含量的測定以選用95 %乙醇作為浸提液比用80 %丙酮效果較好。浸提時間以8 h 以上為宜,24 h 更徹底。秈稻一般比粳稻較易提取,浸提時間可縮短在8 h 內。粳稻浸提時間可略加長。
3. 2 在暗保存下,葉綠素浸提母液降解速度一天內差異不顯著,一星期降解速率為14. 0 ±2. 446 %。這對在實際工作中、在儀器發生故障的情況下采取應變措施是有參考意義的。
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