對蛋白質(zhì)化學(xué)糖的研究
糖鏈在動物以及植物的生長過程中是具有很重要的作用的，它其中含有的一些蛋白質(zhì)含量主要是通過糖基的形式進(jìn)行轉(zhuǎn)化的，糖蛋白通過在生長的過程中進(jìn)行不斷的改變，在這個(gè)過程中我們需要不斷的對蛋白質(zhì)的含量進(jìn)行檢測，通過蛋白質(zhì)測定儀檢測出來的數(shù)據(jù)進(jìn)行每個(gè)階段的記錄，方便我們做后期的研究工作。 因此, 該過程存在微觀不均一性, 可產(chǎn)生系列不同糖型 的產(chǎn)物(肽鏈骨架相同而糖基化程度和位點(diǎn)不同的產(chǎn)物), 給糖蛋白的化學(xué)生物學(xué)效價(jià)的研究帶來了很大難度.
更令人困擾的是, 在糖蛋白藥物的生產(chǎn)上, 即使工藝條件控制得再好, 也會出現(xiàn)上百種糖型產(chǎn)品, 而且批次不同, 產(chǎn)品的糖型比例也不同, 這使糖蛋白藥物的品質(zhì)控制和用藥安全面臨很大挑戰(zhàn). 顯而易見, 獲得糖基結(jié)構(gòu)和糖基化位置確定的糖蛋白能夠大大推動相關(guān)研究的進(jìn)展.到目前為止, 糖蛋白的化學(xué)合成技術(shù)經(jīng)歷了多個(gè)階段. 由于糖蛋白分子量大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜, 早期糖化學(xué)家和生物學(xué)家主要關(guān)注具有生物活性的關(guān)鍵糖肽片段的合成。由于糖蛋白具有多羥基、多官能團(tuán)、多手性中心等特點(diǎn), 使得全合成時(shí)操作繁瑣, 路線長; 同時(shí)氨基酸和糖鏈各個(gè)部分的敏感性、保護(hù)基、偶合試劑和反應(yīng)條件的選擇也需要兼顧。
這造成糖蛋白全合成的技術(shù)壁壘很高, 目前僅有少數(shù)實(shí)驗(yàn)室能夠?qū)崿F(xiàn). 近年來, 隨著分離分析技術(shù)的發(fā)展, 糖和蛋白片段的來源大大豐富, 糖蛋白半合成技術(shù)得到了很大發(fā)展. 通過對經(jīng)典有機(jī)反應(yīng)的細(xì)心篩選優(yōu)化, 化學(xué)家已能夠在接近中性的水溶性條件下對蛋白進(jìn)行糖基化,甚至實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞環(huán)境中對蛋白的直接選擇性糖基化反應(yīng). 需要指出的是, 不論哪種技術(shù)路線, 糖片段和蛋白/肽鏈片段的連接都是糖蛋白合成的關(guān)鍵步驟. 因此, 本文將圍繞糖基連接, 以糖蛋白合成技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用為導(dǎo)向, 討論蛋白的化學(xué)糖基化合成進(jìn)展.中國糧油儀器網(wǎng) http://www.de147.cn/
