從葉綠素檢測(cè)儀的測(cè)量原理說起
在植物細(xì)胞中，葉綠素存在葉綠體的類囊體膜中，是植物進(jìn)行光合作用的重要物質(zhì)，相信大家在生物科學(xué)中也都有所認(rèn)識(shí)。高等植物中主要含葉綠素A和葉綠素B，在褐藻、硅藻類中含葉綠素A、C1、C2；紅藻中含葉綠素D等。為了有效區(qū)分出不同植物中的葉綠素含量，大多數(shù)研究人員會(huì)直接利用葉綠素檢測(cè)儀進(jìn)行測(cè)量，快速準(zhǔn)確。
如果還有朋友對(duì)葉綠素檢測(cè)儀不夠了解的話，我們可以從它的測(cè)量原理說起。該儀器是根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見光譜的吸收，利用分光光度計(jì)在某一特定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度，即可用公式計(jì)算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯—比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即A=αCL式中：α比例常數(shù)。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)可通過測(cè)定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)，則此混合液在某一波長(zhǎng)下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長(zhǎng)下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。今欲測(cè)定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量，只需測(cè)定該提取液在三個(gè)特定波長(zhǎng)下的吸光度A，并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測(cè)定葉綠素a、b時(shí)為了排除類胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長(zhǎng)選擇葉綠素在紅光區(qū)的最大吸收峰。
簡(jiǎn)單來說，葉綠素檢測(cè)儀也就是在葉綠素選擇吸收特定波長(zhǎng)光的兩個(gè)波長(zhǎng)區(qū)域，根據(jù)葉片透射光的量來計(jì)算出葉綠素含量的。另外，根據(jù)葉綠素含量，人們可有效判斷出作物對(duì)氮素的需求量，就能合理控制氮肥的施用量，減少浪費(fèi)，這也正是利用儀器測(cè)量的意義所在。
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